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乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象

更新時(shí)間:2024-06-20   點(diǎn)擊次數(shù):471次

一、用途:

  用于乳酸菌的分離培養(yǎng)。


二、實(shí)驗(yàn)原理:

  胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、維生素、生長(zhǎng)因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氫二鉀為緩沖劑;枸櫞酸三銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長(zhǎng)因子,吐溫80為乳酸桿菌提供所需的代謝脂肪酸;檸檬酸銨和乙酸鈉能夠抑制一些雜菌的生長(zhǎng),包括鏈球菌、霉菌和除乳酸桿菌外的大多數(shù)口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它細(xì)菌的生長(zhǎng),有利于乳酸桿菌的分離;加入碳酸鈣是由于乳酸菌在培養(yǎng)基中產(chǎn)酸可以形成溶鈣環(huán),便于區(qū)分;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。


三、培養(yǎng)基配方(g/L):

酵母浸粉

2.0

胰酪蛋白胨

10.0

磷酸二氫鉀

2.0

牛肉浸粉

10.0

硫酸鎂

0.2

葡萄糖

20.0

乙酸鈉

5.0

枸櫞酸三銨

2.0

硫酸錳

0.05

碳酸鈣

5.0

吐溫80

1.0

瓊脂

25.0

pH 6.0-6.5  25℃

此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成分以獲得最佳的結(jié)果

四、試驗(yàn)方法:

  1、稱取本品82.25g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶 200ml,115℃高壓滅菌 15-20min,冷至 50℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用。

  2、制備質(zhì)控菌液。

  3、用1μL接種環(huán)取非目標(biāo)菌質(zhì)控菌液1環(huán),將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃三區(qū),同時(shí)接種兩個(gè)平板。

  4、36±1°C下培養(yǎng)24-48小時(shí),記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。


五、結(jié)果觀察與解釋:

  接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃下培養(yǎng)24-48小時(shí):

質(zhì)控菌株

菌株編號(hào)

接種量(CFU)

方法

質(zhì)控評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

其他特征

嗜酸乳桿菌

CICC6005

/

定性

+++

白色突起菌落,有溶鈣環(huán)

植物乳桿菌

ATCC8014

/

定性

+++

白色突起菌落,有溶鈣環(huán)


圖1 植物乳桿菌微生物質(zhì)控結(jié)果


六、注意事項(xiàng):

  本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分,需做其他補(bǔ)充試驗(yàn)。



注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。


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